
蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小
和形状等因素。如果加入一种生化试剂使电荷因素消除,那电泳迁移率就取决于分子的大小,就可以用电泳技术测定蛋白质的分子量。1967年,shapiro等发现阴离子去污剂
十二烷基硫酸钠(sds)具有这种作用。当向蛋白质溶液中加入足够量索莱宝的sds和巯基乙
醇,sds可使蛋白质分子中的二硫键还原。由于十二烷基硫酸根带负电,使各种蛋白
质—sds复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质分子原的电荷量,
因而掩盖了不同种蛋白质间原有的电荷差别,sds与蛋白质结合后,还可引起构象改
变,蛋白质—sds复合物形成近似“雪茄烟”形的长椭圆棒,不同蛋白质的sds复合物
的短轴长度都不一样,约为18a,这样的蛋白质—sds复合物,在凝胶中的迁移率,不
再受蛋白质原的电荷和形状的影响,而取决于分子量的大小,因而sds聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用于测定蛋白质的分子量。
分子量小的,跑的快。
